南宫NG28

       FluorCam-Pro植物多光谱荧光成像系统是FluorCam叶绿素荧光成像技术的最新高级扩大产品。此系统既可用于PAM脉冲调造式叶绿素荧光动态成像分析，又可用于UV紫表光对植物叶片引发产生的多光谱荧光成像丈量分析，还可选配滤波器组对GFP、RFP、YFP、SYBR Green蹬撰光蛋白和荧光染料进行稳态荧光成像丈量。丈量对象蕴含叶片、果实、花朵、整株拟南芥或其他幼型植株、苔藓、微藻、大型藻类甚至特定的动物样品。

利用领域：

§   植物光合生理生态

§   植物逆境胁迫生理与易感性

§   植物低级代谢与次级代谢

§   植物表型组学成像分析（Phenotyping）

§   作物遗传育种与抗性筛选

§   种子萌发与活力监测

§   转基因植株筛选

职能特点：

§   多引发光-多光谱荧光成像技术：通过两种以上分歧波长的光源引发植物样品中分歧的发色团发出荧光并进行成像检测，即为多引发光多光谱荧光成像技术。植物的多光谱荧光重要蕴含叶绿素荧光、UV紫表光引发多光谱荧光和荧光蛋白荧光

§   FluorCam-Pro无需更换任何配件即可同步实现多引发光-多光谱荧光成像职能：

s  PAM脉冲调造式叶绿素荧光成像

s  紫表引发F440、F520、F690、F740多光谱荧光成像

s  GFP、RFP、YFP等常用荧光蛋白成像

§   可凭据用户必要定造荧光蛋白或荧光染料成像，如BFP、CFP、SYBR Green、DAPI等

§   可对黄酮、花青素含量进行定量丈量

§   可进行自动沉复成像丈量和无人值守监测，可设置尝试法式（Protocols）自动循环成像丈量，成像丈量数据自动按功夫日期存入推算机（带功夫戳）

§   丈量样品为各类活体植物样品，蕴含叶片、花草、果实、整株拟南芥或其他幼型植物、微藻（蕴含液滴、多孔板、固体造就基）及大型藻类等

RFP荧光蛋白荧光：通过RFP荧光象征确定转基因表白地位，并对表白量进行定量分析（以上成像图均由南宫NG28EcoTech?尝试室提供）

技术指标：

§   一体式设计，自带暗适应箱体

§   最佳成像面积：20×20cm

§   丈量参数：Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多个叶绿素荧光参数；紫表引发多光谱荧光成像参数：F440、F520、F690、F740；荧光蛋白荧光强度参数Ft；每项参数均可显示对应二维荧荣耀色图像。并可丈量推算黄酮醇指数Flavonol Index,、花青素指数Anthocyanin Index。

·        具备完整的自动丈量法式（protocol），可自由对自动丈量法式进行编纂

1)       Fv/Fm：丈量参数蕴含Fo，Fm，Fv，QY等叶绿素荧光参数

2)       Kautsky诱导效应：Fo，Fp，Fv，Ft_Lss，QY，Rfd等叶绿素荧光参数

3)       Quenching荧光淬灭分析：Fo，Fm，Fp，Fs，Fv，QY，ΦII，NPQ，Qp，Rfd，qL等50多个叶绿素荧光参数

4)       Light Curve光响应曲线：分歧光强梯度前提下Fo，Fm，QY，QY_Ln，ETR等叶绿素荧光参数

5)       MultiColor紫表引发多光谱荧光成像（选配）

6)       FPs荧光蛋白成像：GFP、YFP、RFP、BFP等（选配）

§   荧光引发光源组：全LED光源，蕴含620nm红光、5700K冷白光、735nm远红光、365nm紫表光，445nm品蓝光，470nm蓝光，505nm青光，530nm绿光，590nm琥珀色光等

§   高分辨率CCD相机

1)       图像分辨率：1360×1024像素

2)       功夫分辨率：在最高图像分辨率下可达每秒20帧

§   具备7位滤波轮，标配叶绿素荧光滤波器，凭据用户必要可定造紫表引发多光谱荧光和GFP、RFP、YFP、BFP蹬撰光蛋白专用滤波器

§   FluorCam叶绿素荧光成像分析软件职能：具Live（实况测试）、Protocols（尝试法式选择定造）、Pre–processing（成像预处置）、Result（成像分析了局）等职能菜单

§   自动丈量分析职能：可设置一个尝试法式（Protocol）自动无人值守循环成像丈量，沉复次数及距离功夫客户自界说，成像丈量数据自动按功夫日期存入推算机（带功夫戳）

§   成像预处置：法式软件可自动鉴别多个植物样品或多个区域，也可手动选择区域（Region of interest，ROI）。手动选区的状态可所以方形、圆形、肆意多边形或扇形。软件可自动丈量分析每个样品和选定区域的荧光动力学曲线及相应参数，样品或区域数量不受限度（>1000）

§   输出了局：高功夫解析杜撰光动态图、荧光动态变动视频、荧光参数Excel文件、直方图、分歧参数成像图、分歧ROI的荧光参数列表等

利用案例：

1.      抗病毒基因钻研：叶绿素荧光成像与GFP成像结合分析

法国国度农业科学钻研院一向致力于马铃薯y病毒组的抗病基因钻研，通过分歧基因编纂处置步骤，验证抗病毒分子机造。有关钻研中，钻研人员利用FluorCam多光谱荧光成像系统的GFP荧光蛋白成像职能，定量分析习染面积与病毒堆集量，从而直观地反映了分歧基因职能对拟南芥病毒抗性的影响。同时，叶绿素荧光成像则反映病毒对光合系统的危险，同步提供植物的光合表型信息。

参考文件：

§   Zafirov D, et al. 2021. When a knockout is an Achilles' heel: Resistance to one potyvirus species triggers hypersusceptibility to another one in Arabidopsis thaliana. Mol Plant Pathol. 22: 334–347

§   Bastet A, et al. 2019. Mimicking natural polymorphism in eIF4E by CRISPR‐Cas9 base editing is associated with resistance to potyviruses. Plant Biotechnology Journal 17: 1736–1750

§   Bastet A, et al. 2018. Trans-species synthetic gene design allows resistance pyramiding and broad-spectrum engineering of virus resistance in plants. Plant Biotechnology Journal: 1–13

2.      分歧色彩凌霄叶片的叶绿素荧光与紫表引发多光谱荧光成像分析（南宫NG28EcoTech?尝试室）

RGB彩色成像                         最大光化学效能Fv/Fm

非光化学淬灭系数NPQ            次生代谢物荧光F520（多酚、黄酮等）

产地：欧洲